1. a)  中和剂+病毒悬液/病毒载体→接种细胞培养:观察中和剂对病毒有无抑制作用。

2. b)  (消毒剂/消毒剂载体+中和剂)+病毒悬液/病毒载体→接种细胞培养:观察中和产物，或未被

   完全中和的残留消毒剂对病毒有无抑制作用或对检测方法有无干扰。

3. c)  病毒悬液/病毒载体→接种细胞培养:观察病毒是否可致细胞病变，并将该组病毒滴度对数值

   作为阳性对照值。

4. d)  未接种病毒的细胞→培养:观察细胞生长是否正常
   
   
   

悬液法中和剂鉴定试验：

1. a)  第1组。试验体系中按病毒与中和剂(1‥4体积比例)进行试验。吸取0.2mL病毒混悬液于 试管内，置 20 °C±1 °C中 5 min 后，吸取中和剂溶液 0.8 mL，混合均匀。作用 10 min，以 细胞维持液作10倍系列稀释，吸取样液100 μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种4 孔。置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C,5%±1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。

2. b)  第2组。试验体系中按病毒与中和产物(1‥4体积比例)进行试验。吸取0.2mL病毒混悬液 于试管内，置 20 °C±1 °C中 5 min 后，吸取中和产物溶液 0.8 mL，混合均匀。作用 10 min， 以细胞维持液作 10 倍系列稀释，吸取样液 100 μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种 4 孔。置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C，5%±1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。
   

   c) 第3组。试验体系中按病毒与细胞维持液(1:4体积比例)进行试验。吸取0.2mL病毒混悬 液于试管内，置 20 °C±1 °C中 5 min 后，吸取细胞维持液 0.8 mL，混合均匀。作用 10 min， 以细胞维持液作 10 倍系列稀释，吸取样液 100 μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种 4 孔。置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C，5%±1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。

   d) 第4组。将试验用细胞，加细胞维持液后置二氧化碳培养箱(36°C±1°C，5%±1%二氧化碳) 中培养。

   
   

   
   

载体法中和剂鉴定试验：

1. a)  第1组。将病毒载体置20°C±1°C中5min后，浸入中和剂1.0mL，作用10min。充分洗 脱，以细胞维持液作 10 倍系列稀释，吸取样液 100 μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度 接种 4 孔。置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C，5%±1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。

2. b)  第2组。将病毒载体置20°C±1°C中5min后，浸入中和产物溶液(染有消毒剂的载体+中和 剂,作用 10 min)1.0 mL，混合均匀。充分洗脱，以细胞维持液作 10 倍系列稀释，吸取样液 100μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种 4 孔。置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C，5%± 1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。

3. c)  第3组。将病毒载体置20°C±1°C中5min后，浸入细胞维持液1.0mL，充分洗脱，以细胞 维持液作10倍系列稀释，吸取样液100 μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种4孔。 置二氧化碳培养箱(36 °C±1 °C，5%±1% 二氧化碳)中培养 3-4 天。

4. d)  第4组。将试验用细胞，加细胞维持液后置二氧化碳培养箱(36°C±1°C,5%±1%二氧化碳) 中培养。